Francisco Javier Otero Espinar. Catedrático del Departamento de Farmacia y Tecnología Farmacéutica de la Facultad de Farmacia de la USC
Un listado con todas las pruebas que se están utilizando para la detección de Covid
El Comité de Seguridad Sanitaria ha elaborado un listado de pruebas en base a las recomendaciones emitidas por el Consejo de la Unión Europea para el uso y la validación de test rápidos de antígenos y el reconocimiento mutuo de los resultados de los test de COVID-19 en la Unión Europea.
Las pruebas de antígeno deben cumplir unos requisitos:
- Marcado CE;
- Rendimiento de ≥ 90% sensibilidad y ≥97% especificidad.
- Haber sido validados por al menos un Estado miembro como apropiados para su uso en el contexto de la COVID-19, proporcionando detalles sobre la metodología y los resultados de dichos estudios.
Hay que indicar que es importante tanto el término sensibilidad como especificidad (Gráfico 3). Una prueba específica es aquella que es muy selectiva y, por lo tanto, es capaz de distinguir perfectamente el sustrato (Gráfico 4) para el que está diseñada su interacción. Por lo tanto, aún en presencia de otros sustratos parecidos son capaces de distinguirlos e interaccionar sólo con el adecuado. Este término no tiene por qué estar necesariamente relacionado con su sensibilidad ya que un test muy específico puede necesitar de la presencia de una concentración elevada de sustrato para interaccionar y dar la señal. Por el contrario, un método muy sensible va a proporcionarnos una buena señal aún en presencia de cantidades muy pequeñas de sustrato, pero si es poco específico puede confundir el sustrato con otro que tenga una estructura parecida. Lo ideal es que el método sea sensible y específico dentro de los intervalos que nos marca el Comité de Seguridad Sanitaria (≥90% sensibilidad y ≥97% especificidad) para considerarlo fiable. También es importante que su exactitud sea elevada; este parámetro mide la capacidad que tiene la prueba para darnos el mismo resultado si la repetimos varias veces. Una prueba con una precisión alta, ej. 98%, nos indicaría que si nos hacemos la prueba 100 veces nos daría el mismo resultado en 98 ocasiones y que en dos, podría darnos diferente.
Para diagnóstico rápido se emplean test basados en inmunoensayos cuyos marcadores pueden ser antígenos, anticuerpos e inmunoglobulinas como la IgG e IgM. También hay alguno que emplea inmunocromatografía. (Gráfico 1)
Se puede acceder a un listado de los test rápidos comercializados en Europa en la página “COVID-19 In Vitro Diagnostic Devices and Test Methods Database” en el siguiente enlace:
https://covid-19-diagnostics.jrc.ec.europa.eu/devices
En esta página podemos encontrar información específica de cada una de las pruebas rápidas como es su sensibilidad (Clinical Sensitivity), su especificidad (Clinical Specificity) o su precisión (Accuracy).
En esta página se pueden encontrar también otro tipo de test diferentes a los diagnósticos rápidos que utilizan anticuerpos o antígenos como marcadores, como es el caso de los test ELISA y los CLIA, o los ácidos nucleicos como las PCR o las LAMP o los CRYSP, aunque de estos últimos no existe ninguno con marcado CE.
Sus características básicas de forma resumida: en qué consisten, cómo se realizan, dónde se realizan y qué información aportan (Gráfico 1)
Los inmunoensayos se basan en la formación de asociaciones (complejos) entre antígenos y anticuerpos específicos que, una vez formados, emiten una señal que puede medirse. En la Covid existen pruebas para detectar anticuerpos o antígenos (Gráfico 2).
En las pruebas de antígeno, el test posee un anticuerpo específico capaz de interaccionar exclusivamente con antígenos de la COVID constituidos por proteínas que se encuentran en la superficie del virus. Estas pruebas de antígenos sirven para detectar la presencia del virus en la persona y son menos sensibles que las PCR: permiten identificar solo a los casos que poseen un mínimo de carga viral, es decir detectan personas que se encuentran en el pico de infección que es cuando son muy contagiosas. Se realizan tomando muestras de fluidos procedentes de la garganta o la nariz que se tratan con reactivos para liberar las proteínas de cubierta (antígenos) y se ponen en contacto con el anticuerpo específico para detectar la reacción, en caso de positivos. Se han desarrollado también test para detectar antígenos en saliva.
La fiabilidad de los test de antígenos se sitúa entre el 80 y el 99% dependiendo del modelo.
Las pruebas que detectan anticuerpos constan de antígenos específicos para ese anticuerpo por lo que solo dan señales si está presente dicho anticuerpo. Son serológicos, es decir, se hacen sobre muestras de sangre que pueden proceder, por ejemplo, de la punción en el dedo o mediante extracción, y detectan la presencia de anticuerpos e inmunoglobulinas (IgG e IgM) que se producen por haber estado en contacto con el virus. Un positivo significa que se han generado anticuerpos (respuesta del sistema inmune del organismo a la presencia del SARS–CoV-2) y, por lo tanto, que la persona ha estado en contacto con el virus, pero no indica si está infectada. En el caso de que el paciente haya tenido un contacto con alguna persona infectada, los anticuerpos IgM son los primeros anticuerpos que aparecen, entre los 7 y 10 días de dicho contacto; y los anticuerpos IgG aparecen entre los 10 y 15 días. Se puede producir la aparición de falsos positivos ya que son pruebas muy sensibles, pero menos específicas que otras pruebas que usan técnicas como ELISA o CLIA. También pueden aparecer falsos negativos en el caso de que la cantidad de muestra tomada no sea la adecuada.
Por lo tanto, no es aconsejable el uso de las pruebas de anticuerpos para el diagnóstico de un paciente sospechoso de padecer la enfermedad. Para estos casos las pruebas de diagnóstico adecuadas frente a la infección por COVID-19 se basan en la detección del RNA del virus (prueba de la PCR) o en la detección de sus antígenos (test de antígenos).
